Цитогенетический анализ клеток костного мозга (кариотип)

Показания к назначению цитогенетического исследования

Цитогенетический метод используется для изучения кариотипа человека и диагностики наследственных заболеваний, вызванных хромосомными мутациями. Также он представляет диагностическую ценность при выявлении мутагенного воздействия лекарственных веществ.

Показания:

• подозрение хромосомной патологии по симптомам;
• первичная аменорея;
• бесплодие неясного генеза;
• многократные спонтанные аборты, замершая беременность;
• врожденные пороки развития у ребенка;
• задержка умственного и физического развития у ребенка;
• случаи мертворождения, врожденных пороков развития и ранней детской смертности в семье;
• нарушение формирования половых различий у новорожденного.

Цитогенетическое исследование (кариотипирование) проводится у детей для обнаружения генетических заболеваний и у семейных пар при бесплодии. Также анализ необходим перед проведением вспомогательной репродуктивной технологии (ЭКО, ИКСИ).

Цитогенетическое исследование и молекулярное кариотипирование

Консультация гинеколога-репродуктолога – БЕСПЛАТНО

1. МАТЕРИАЛ ИССЛЕДОВАНИЯ – МАТЕРИАЛ АБОРТУСА

Собирается при чистке замершей беременности (или анэмбрионии)- это ворсинки хориона, ткани плаценты. Цель исследования – кариотипирование – исследования хромосом под микроскопом: количество, размеры и морфологические особенности. Ряд хромосомных заболеваний можно диагностировать по изменению количества хромосом, или по любым другим внутрихромосомным и междухромосомным перестройкам. Любые отклонения от нормы могут стать причиной замирания беременности и аномалий.

Информацию о генетическом коде и возможных мутациях несут ворсинки хориона – ткани плаценты, полученные после выскабливания матки. Если причины остановки развития эмбриона имеют генетическую природу, исследование безошибочно покажет, в какой хромосомной паре возникают нарушения. Важно наличие ворсин хориона в биоматериале.

Только при вакуум-аспирации или выскабливании замершей беременности (анэмбрионии) возможно полноценно взять биоматериал для генетического исследования. В случае же медикаментозного аборта собрать материал абортуса (сгустки) возможно, но гарантировать наличие ворсин хориона в нем, по которым проводится генетическое исследование, не всегда представляется возможным. В случае отсутствия ворсин хориона исследование провести невозможно.

Материал собирается строго!!! по инструкции. Методикой сбора биоматериала для генетического исследования владеет хирург, производящий операцию.

Возможны следующие виды генетических исследований материала абортуса:

–цитогенетическое исследование живого клеточного материала (проводится до 14-15 нед. беременности; исследование должно начаться не позже 24 часов после получения биоматериала абортуса с целью сохранения жизнеспособности клетки);

–молекулярно-генетическое исследование по ДНК (срок беременности, как и время проведения исследования значения не имеют).

Методика цитогенетического исследования

Анализ проводится мтодом метафазных пластинок, препараты которых получают из клеток цитотрофобласта ворсинчатого хориона ускоренным “прямым” методом. Из пробы извлекаются одноядерные лейкоциты и к ним добавляют делящиеся клетки. Исследуются под микроскопом клетки, полученные после остановки этапа деления. Клетки окрашиваются специальным красителем, фотографируются и исследуются хромосомы под микроскопом.

Показатели нормы: 1. У мужчин – 46 XY 2. У женщин – 46 ХХ

Стоимость цитогенетического исследования в клинике “Медсервис”

!!! Важно для сторонних организаций: при сдаче биматериала на цитогенетическое исследование (памятка врачу, как осуществлять забор, прилагается) заполняются анкета и и информированное согласие и вместе с материалом абортуса предоставляются в клинику “Медсервис, соблюдая режим холодильника.

Эффективность цитогенетического исследования определяется в основном качеством отобранного материала. Исследование проводят на живых клетках, поэтому желательно, чтобы время нахождения замершего плода внутриутробно не превышал 2 нед.

Для цитогенетического исследования важно, чтобы клетки биоматериала были живыми. Чтобы обезопасить себя от невозможности провести исследование на «живом» клеточном материале (его может не быть в материале абортуса по разным причинам) прибегают к методу молекулярного кариотипирования, исследуя ДНК. При этом сохранность клеток в живом состоянии не важна.

Кроме этого сам метод имеет ограничения. Если исследования показывает мужской кариотип, то полученный результат относится к эмбриону, если женский, то результат может относится как к эмбриону, так и матери. Дальнейшая врачебная тактика заключается в генетическом обследовании матери. При молекулярном генетическом исследовании это исключено, так как исследование идет по ДНК, которая для каждого человека индивидуальна.

Молекулярное кариотипирование материала абортуса

Для проведения исследования используется ДНК, выделенная из биоматериала, а не клеточная культура, как в цитогенетическом исследовании. Это снижает риск влияния качества биоматериала на возможность проведения анализа (клетки абортивного материала могут не сохранить жизнеспособность внутриутробно и в условиях забора) и исключает в случае женского кариотипа неоднозначность принадлежности исследования матери или эмбриону.

Молекулярное кариотипирование позволяет определить не только грубые нарушения структуры хромосом, видимые под микроскопом, как в случае с цитогенетическим исследованием, но и мелкие субмикроскопические изменения с помощью хромосомного микроматричного анализа. Для этого анализа также берется кровь матери для очищения полученных показателей эмбриона от показателей матери.

Возможно молекулярно-генетическое исследование без предоставления крови матери, тогда исследование будет направлено на выявление анеуплоидий методом секвенирования нового поколения (NGS). Данное исследование выявляет распространенные генетические нарушения кариотипа. Охват остальных патологий генома у данного анализа занимает около 40%, что является ограничением данной методики.

Стоимость молекулярно-генетических исследований в клинике “Медсервис”

!!! Важно для сторонних организаций: при сдаче анализов на молекулярное исследование материала абортуса заполняются анкета и и информированное согласие, берется кровь матери в пробирку К2Е К2EDTA с фиолетовой крышкой и все вместе предоставляется в клинику “Медсервис”, соблюдая режим холодильника.

2. МАТЕРИАЛ ИССЛЕДОВАНИЯ – ВЕНОЗНАЯ КРОВЬ ЧЕЛОВЕКА

Цель исследования – выявление нарушений хромосомного набора человека при планировании беременности. Устанавливается генетическую совместимость партнеров.

Цитогенетическое исследование также необходимо при:

• бесплодии
• наличии у одного из супругов генетических патологий
• невынашиваемости беременности
• нарушении полового развития
• возрастным беременным – старше 35 лет;
• рождении ребенка с наличием генетической патологии

Позвонить онлайн Записаться на приём

Как подготовиться к исследованию

Кариотипирование назначается после консультации врача-генетика по показаниям.

Генетическая диагностика требует соблюдения следующих правил подготовки:

• за 1,5-2 часа до сдачи необходимо принять пищу, так как нельзя сдавать анализ натощак;
• накануне исключить алкоголь, курение, значительные физические нагрузки;
• исключить прием антибиотиков за один месяц до сдачи;
• не рекомендуется одновременная сдача анализов, требующих строгой подготовки (клинические, биохимические);
• нельзя сдавать анализ на фоне инфекционных/воспалительных заболеваний (отложить на две недели).

Молекулярное исследование может проводиться прямой и непрямой методикой. Прямой метод – это цитогенетический анализ клеток костного мозга, эмбриона или опухолей. Для непрямого метода в качестве материала используются лейкоциты периферической крови (лимфоциты), которые исследуют после специальной подготовки.

Результаты исследования

Результат составляется согласно Международной номенклатуре цитогенетики. Запись кариотипа должна отвечать стандартному формату: [общее количество аутосом], [половые X или Y-хромосомы], [особенности].

В норме человеческий кариотип выглядит так:

• 46, XY – нормальный мужской;
• 46, XX – нормальный женский.

Варианты патологии могут выражаться различными формами кариотипов. Различают следующие виды хромосомных нарушений:

• количественные аномалии (триплоидия, полиплоидия, моносомия, дисомия, трисомия, полисомия, аномалии половых хромосом);
• структурные аномалии (делеции, инверсии, транслокации, кольцевая хромосома, изохромосома).

Структурные аномалии встречаются редко, но характеризуются тяжелой симптоматикой. Обнаружение хромосомных перестроек цитогенетическим анализом позволяет определить причину бесплодия и спрогнозировать риск рождения детей с генетическими заболеваниями.

Факторы, влияющие на результаты исследований

На качество диагностики влияет соблюдение подготовки, курение, алкоголь, физические нагрузки и стресс. Состав рациона питания и прием лекарственных препаратов не оказывают никакого влияния.

Основными факторами являются:

• правильно выбранный материал для цитогенетического исследования;
• качество окрашивания препарата;
• квалификация врача-цитогенетика.

Достоверные результаты требуют соблюдения всех этапов анализа. После взятия крови лимфоциты культивируются на специальной среде, активирующей митоз (деление клеток). При достижении метафазы добавляется вещество, останавливающее деление (колхицин/колцемид). В эту фазу набор хромосом наиболее различим. После обработки гипотоническим раствором лимфоциты переносят на предметное стекло, фиксируются и окрашиваются. Окрашенный препарат изучается под световым микроскопом. Цитогенетическое исследование клеток костного мозга не требует дополнительных воздействий на клетки.

Цитогенетические исследования

Цитогенетическое исследование – это качественное и количественное изучение набора хромосом для выявления аномалий, которые могут явиться причиной бесплодия, наследственных заболеваний или рождения ребенка с врожденными пороками развития.

Показания к назначению цитогенетического исследования

Цитогенетический метод используется для изучения кариотипа человека и диагностики наследственных заболеваний, вызванных хромосомными мутациями. Также он представляет диагностическую ценность при выявлении мутагенного воздействия лекарственных веществ.

Показания:

• подозрение хромосомной патологии по симптомам;
• первичная аменорея;
• бесплодие неясного генеза;
• многократные спонтанные аборты, замершая беременность;
• врожденные пороки развития у ребенка;
• задержка умственного и физического развития у ребенка;
• случаи мертворождения, врожденных пороков развития и ранней детской смертности в семье;
• нарушение формирования половых различий у новорожденного.

Цитогенетическое исследование (кариотипирование) проводится у детей для обнаружения генетических заболеваний и у семейных пар при бесплодии. Также анализ необходим перед проведением вспомогательной репродуктивной технологии (ЭКО, ИКСИ).

Как подготовиться к исследованию

Кариотипирование назначается после консультации врача-генетика по показаниям.

Генетическая диагностика требует соблюдения следующих правил подготовки:

• за 1,5-2 часа до сдачи необходимо принять пищу, так как нельзя сдавать анализ натощак;
• накануне исключить алкоголь, курение, значительные физические нагрузки;
• исключить прием антибиотиков за один месяц до сдачи;
• не рекомендуется одновременная сдача анализов, требующих строгой подготовки (клинические, биохимические);
• нельзя сдавать анализ на фоне инфекционных/воспалительных заболеваний (отложить на две недели).

Молекулярное исследование может проводиться прямой и непрямой методикой. Прямой метод – это цитогенетический анализ клеток костного мозга, эмбриона или опухолей. Для непрямого метода в качестве материала используются лейкоциты периферической крови (лимфоциты), которые исследуют после специальной подготовки.

Результаты исследования

Результат составляется согласно Международной номенклатуре цитогенетики. Запись кариотипа должна отвечать стандартному формату: [общее количество аутосом], [половые X или Y-хромосомы], [особенности].

В норме человеческий кариотип выглядит так:

• 46, XY – нормальный мужской;
• 46, XX – нормальный женский.

Варианты патологии могут выражаться различными формами кариотипов. Различают следующие виды хромосомных нарушений:

• количественные аномалии (триплоидия, полиплоидия, моносомия, дисомия, трисомия, полисомия, аномалии половых хромосом);
• структурные аномалии (делеции, инверсии, транслокации, кольцевая хромосома, изохромосома).

Структурные аномалии встречаются редко, но характеризуются тяжелой симптоматикой. Обнаружение хромосомных перестроек цитогенетическим анализом позволяет определить причину бесплодия и спрогнозировать риск рождения детей с генетическими заболеваниями.

Факторы, влияющие на результаты исследований

На качество диагностики влияет соблюдение подготовки, курение, алкоголь, физические нагрузки и стресс. Состав рациона питания и прием лекарственных препаратов не оказывают никакого влияния.

Основными факторами являются:

• правильно выбранный материал для цитогенетического исследования;
• качество окрашивания препарата;
• квалификация врача-цитогенетика.

Достоверные результаты требуют соблюдения всех этапов анализа. После взятия крови лимфоциты культивируются на специальной среде, активирующей митоз (деление клеток). При достижении метафазы добавляется вещество, останавливающее деление (колхицин/колцемид). В эту фазу набор хромосом наиболее различим. После обработки гипотоническим раствором лимфоциты переносят на предметное стекло, фиксируются и окрашиваются. Окрашенный препарат изучается под световым микроскопом. Цитогенетическое исследование клеток костного мозга не требует дополнительных воздействий на клетки.

Интерпретация результата

Расшифровка результатов должна проводиться врачом. При постановке диагноза учитываются результаты цитогенетического исследования хромосом, анамнез, клиническая картина и показатели других лабораторных тестов.

В норме кариотип человека состоит из 22 пар аутосом и двух половых хромосом (46XX, 46XY).

При генетических заболеваниях кариотипы могут представляться следующим образом:

• 47XXY, 48XXXY (лишняя Х у мужчин) – синдром Клайнфельтера;
• 45XO (моносомия по X) – синдром Шерешевского-Тернера;
• 47XXX, 48XXXX (лишняя X) – трисомия по X;
• 47XYY (лишняя Y) – XYY-синдром;
• 69XXX, 69XXY, 69XYY – триплоидия;
• 47XX +21, 47XY +21 (трисомия по 21-й хромосоме) – синдром Дауна;
• 47XX +18, 47XY +18 (трисомия по 18-й хромосоме) – синдром Эдвардса;
• 47XX +13, 47XY +13 (трисомия по 13-й хромосоме) – синдром Патау;
• делеция 5p15 – синдром Лежена (кошачьего крика);
• делеция 4p16 – синдром Вольфа-Хиршхорна;
• делеция 22q11 – синдром Ди Джорджа;
• делеция 15q11-13 – синдром Ангельмана;
• делеция 15q11-13 – синдром Прадера-Вилли.

Структурные патологии записываются в форме: [номер хромосомы], [плечо], [номер участка], [номер полосы]. Длинное плечо обозначается буквой q, а короткое – буквой p. Делеции, выявленные у мужчины, зачастую являются причиной мужского бесплодия. А в некоторых случаях они могут провоцировать врожденные патологии у плода.

Если выявлен патологический хромосомный набор, то в обязательном порядке показана консультация медицинского генетика. Только специалист может провести правильную интерпретацию результатов. Если патология обнаружена на этапе планирования беременности, врач объяснит паре риск рождения больного ребенка. Дальнейшее решение будут принимать будущие родители.

Сделать цитогенетический анализ можно в Центре Молекулярной Медицины. Мы используем оборудование, позволяющее получить изображение высокого качества, поэтому при выполнении анализа участки хромосом исследуются с точностью 99,9%. Благодаря генетической диагностике супружеские пары могут зачать здорового малыша, предотвратить произвольное прерывание беременности и подготовиться к проведению вспомогательных репродуктивных технологий.

Интерпретация результата

Расшифровка результатов должна проводиться врачом. При постановке диагноза учитываются результаты цитогенетического исследования хромосом, анамнез, клиническая картина и показатели других лабораторных тестов.

В норме кариотип человека состоит из 22 пар аутосом и двух половых хромосом (46XX, 46XY).

При генетических заболеваниях кариотипы могут представляться следующим образом:

• 47XXY, 48XXXY (лишняя Х у мужчин) – синдром Клайнфельтера;
• 45XO (моносомия по X) – синдром Шерешевского-Тернера;
• 47XXX, 48XXXX (лишняя X) – трисомия по X;
• 47XYY (лишняя Y) – XYY-синдром;
• 69XXX, 69XXY, 69XYY – триплоидия;
• 47XX +21, 47XY +21 (трисомия по 21-й хромосоме) – синдром Дауна;
• 47XX +18, 47XY +18 (трисомия по 18-й хромосоме) – синдром Эдвардса;
• 47XX +13, 47XY +13 (трисомия по 13-й хромосоме) – синдром Патау;
• делеция 5p15 – синдром Лежена (кошачьего крика);
• делеция 4p16 – синдром Вольфа-Хиршхорна;
• делеция 22q11 – синдром Ди Джорджа;
• делеция 15q11-13 – синдром Ангельмана;
• делеция 15q11-13 – синдром Прадера-Вилли.

Структурные патологии записываются в форме: [номер хромосомы], [плечо], [номер участка], [номер полосы]. Длинное плечо обозначается буквой q, а короткое – буквой p. Делеции, выявленные у мужчины, зачастую являются причиной мужского бесплодия. А в некоторых случаях они могут провоцировать врожденные патологии у плода.

Если выявлен патологический хромосомный набор, то в обязательном порядке показана консультация медицинского генетика. Только специалист может провести правильную интерпретацию результатов. Если патология обнаружена на этапе планирования беременности, врач объяснит паре риск рождения больного ребенка. Дальнейшее решение будут принимать будущие родители.

Сделать цитогенетический анализ можно в клинике «Профимедика». Мы используем оборудование, позволяющее получить изображение высокого качества, поэтому при выполнении анализа участки хромосом исследуются с точностью 99,9%. Благодаря генетической диагностике супружеские пары могут зачать здорового малыша, предотвратить произвольное прерывание беременности и подготовиться к проведению вспомогательных репродуктивных технологий.

Смотрите также: Генетическое установление родства

Цены:

Стоимость цитогенетических исследований

Цитогенетическое исследование (кариотип) (кровь венозная)

Цитогенетическое обследование — анализ на выявление нарушений хромосомного набора человека.

Хромосомы представляют собой плотно упакованные нити ДНК, которая содержит информацию о геноме человека. Количество и структура хромосом строго специфична для каждого вида. У человека в ядрах соматических (не половых) клеток содержится в норме 46 хромосом (23 пары). Одна из пар — половые хромосомы — определяет пол человека. У женщины имеется 2 X хромосомы, такой кариотип обозначается как 46XX, у мужчины есть одна X и одна Y хромосома (кариотип 46XY). Неполовые хромосомы называются аутосомами.

Хромосомы в обычном состоянии клетки в ядре не видны, они становятся видны под микроскопом только на определенных фазах деления клеток. Для изучения кариотипа используются клетки в метафазе митоза.

Для проведения исследования у пациента берут кровь и выделяют из нее лимфоциты. Далее с помощью специальных веществ заставляют лимфоциты делиться. Через несколько дней деления культура обрабатывается специальным веществом, которое останавливает процесс деления клеток именно на той стадии, когда видны хромосомы. Из клеток культуры готовятся специальные мазки на стеклах, которые используются для исследования. В лаборатории «ГЕМОХЕЛП» просматривают митозы под световым микроскопом OLYMPUS BX 43F с использованием цифровой камеры высокого разрешения аппаратно-программного комплекса CytoLabView.

Выделяют две стадии данного исследования.

Первой стадией анализа ограничиваются большинство цитогенетических лабораторий. Специалист генетик анализирует под микроскопом 11-15 клеток (митозов) на предмет выявления количественных и структурных аберраций (мутаций, изменений).

К количественным аберрациям относятся изменения числа хромосом. Например, при синдроме Дауна имеется лишняя 21-я хромосома. Структурные аберрации представляют собой изменение самих хромосом (инверсия — поворот участка хромосомы на 180 гр., делеция — выпадение участка хромосомы, транслокация — перенос части одной хромосомы на другую хромосому, и т. д.).

В результате данного исследования выдаются результаты, где может быть указано: 46, ХХ (нормальный женский кариотип), 46, ХY (нормальный мужской кариотип), 45, ХО (синдром Шерешевского-Тернера), 45, XX, der (13; 14)(q10; q10) (робертсоновская транслокация) и др.

Аберрации могут носить регулярный и нерегулярный характер. Регулярные аберрации обнаруживаются в большом проценте клеток или во всех клетках. Они передаются от родителей, возникают в момент зачатия или в первые дни после зачатия. Нерегулярные мутации чаще всего являются свидетельством воздействия на организм неблагоприятных факторов (радиация, химические вредности и пр.).

Заболевания, обусловленные нарушениями в кариотипе.

Для выяснения следов действия вредных факторов на геном анализа 11-15 клеток бывает недостаточно.

В этом случае проводится вторая стадия исследования — расширенное генетическое обследование, при котором подробно анализируется 100 клеток, и рассчитывается процент аномальных метафаз. Этот анализ хорошо выявляет возможные следы действия вредных факторов на геном человека.

В лаборатории «ГЕМОХЕЛП» проводится лишь первая стадия исследования.

Показания к назначению исследования:

• возраст будущих родителей (35 лет и старше, даже если этому пункту отвечает только один из супругов);
• бесплодие неустановленного происхождения;
• многократные и безуспешные попытки искусственного оплодотворения (ЭКО);
• наличие наследственного заболевания у одного из супругов;
• расстройства гормонального баланса у женщины;
• нарушение образования сперматозоидов (сперматогенеза) с неустановленной причиной;
• неблагоприятное экологическое окружение;
• воздействие вредных факторов на женщину, особенно в недавнем прошлом: курение, алкоголь, наркотики, прием лекарственных препаратов;
• наличие самопроизвольного прерывания беременности (выкидыши, преждевременные роды, замершие беременности);
• близкородственные браки;
• наличие ребенка/детей с хромосомными патологиями или врожденными пороками развития.