Гистологическое исследование (патоморфологическое исследование)

Гистологическое исследование — изучение образцов тканей тела под микроскопом. Оно широко применяется в современной медицине и помогает установить точный диагноз при ряде заболеваний, в первую очередь онкологических. В большинстве случаев это единственный способ окончательно разобраться, является ли злокачественной опухоль, обнаруженная во время УЗИ, КТ, МРТ или эндоскопического исследования.

Наш эксперт в этой сфере:

Готовцева Владлена Александровна

Врач-онколог

Позвонить врачу

Гистологические исследования появились и были внедрены в клиническую практику довольно давно. Со временем технологии совершенствовались, появились новые методы исследования образцов тканей. Многие процессы были автоматизированы, цифровые технологии помогли существенно улучшить качество изображений, отправлять их коллегам из других клиник и лабораторий одним нажатием кнопки. Благодаря бурному развитию молекулярной биологии и генетики, стали доступны иммуногистохимические анализы, исследования хромосом и последовательности генетического кода.

Клиника Медицина 24/7 сотрудничает с ведущими лабораториями, в которых проводятся гистологические исследования, все виды молекулярно-генетической диагностики. Анализы выполняются лучшими патоморфологами с применением новейшего оборудования. Это помогает установить максимально точный диагноз и назначить оптимальное лечение.

Показания

Главное показание к проведению гистологического исследования — подозрение на злокачественную опухоль. Трансформация нормальной клетки в раковую начинается с нарушений на молекулярном уровне. Происходят определенные мутации в генах, из-за этого меняется структура соответствующих белков, или они начинают вырабатываться в слишком большом количестве. Как следствие, изменяется внешний вид клеток, архитектоника (структура) ткани. Эти изменения можно обнаружить, изучая ткань под микроскопом. Гистологическое исследование помогает установить окончательный диагноз, определить гистологический тип злокачественной опухоли, стадию заболевания и назначить правильное лечение.

Кроме онкологических заболеваний, гистологические исследования помогают в диагностике следующих патологий:

• доброкачественные новообразования, предраковые состояния;
• заболевания печени, например, цирроз;
• язвенная болезнь желудка, двенадцатиперстной кишки;
• заболевания почек;
• некоторые инфекционные, воспалительные процессы;
• аутоиммунные патологии, системные васкулиты, заболевания соединительной ткани;
• после трансплантации органов гистологическое исследование помогает разобраться, не началось ли отторжение, не рецидивировало ли заболевание.

При многих заболеваниях гистологические исследования помогают не только правильно установить диагноз, но и проконтролировать эффективность лечения, когда оно уже проводится.

Как получают материал для гистологического исследования?

Образец ткани получают с помощью процедуры, которая называется биопсией. Она бывает разных видов:

• Эксцизионная — патологическое образование удаляют полностью. Такие операции одновременно являются и лечебными, и диагностическими.
• Инцизионная — удаляют часть патологического образования.
• Эндоскопическая — материал для исследования получают во время эндоскопических исследований полых органов, например, желудка, кишечника, мочевого пузыря, матки.
• Бритвенная — врач сбривает с помощью острого лезвия новообразование, возвышающееся над поверхностью кожи.
• Толстоигольная (трепан-биопсия) — получение столбика ткани с помощью трепана, специального инструмента в виде трубки с заостренным краем.
• Тонкоигольная аспирационная — с помощью иглы, соединенной со шприцем.
• Пайпель-биопсия — сбор образцов ткани из полости матки с помощью трубочки с боковым отверстием на конце, внутри которой находится поршень для создания отрицательного давления.
• Диагностическое выскабливание тела и шейки матки.
• Тонкоигольная эндоскопическая биопсия под контролем эндоУЗИ — получение материала с помощью иглы, введенной через стенку органа во время эндоскопического исследования.
• Мазки, отпечатки, соскобы.

Не все эти процедуры позволяют получить ткань органов с сохраненной структурой. Иногда для диагностики достаточно отдельных клеток — их изучение называется цитологическим исследованием. Врач выбирает подходящий вид биопсии, в зависимости от характера заболевания, размеров, локализации патологического образования и других факторов.

Как это происходит

Если у потерпевшего подтвердили опухоль, но еще не до конца разобрались с ее особенностями, то ему предписывают пройти прижизненную гистологию. Причем для лаборанта практически все равно из какой части тела будет извлечен биологический материал, лишь бы это была зона поражения и хирург смог достать достаточно поврежденных клеток.

Для осуществления задуманного привлекают несколько форматов биопсии в зависимости от текущих возможностей медиков и потребностей конкретного потребителя:

• эксцизионную;
• пункционную;
• вырезную из удаленного органа;
• щипцовую;
• аспирационную;
• кюретаж.

В большинстве случаев медики ограничиваются первым вариантом, так как он предусматривает получение нужного количества ткани во время иссечения, когда проводится общая операция. Не менее часто в медицинской практике встречается пункционная версия. Она характеризуется пункцией патологического очага за счет иглы, с помощью которой извлекается кусочек проблемной ткани.

Щипцовое предложение является ничем иным, как обычным скусыванием нужной части патологического образования специальными щипчиками – отсюда и говорящее за себя название. Применяют щипцовое решение при совместной эндоскопии вроде:

• эзофагогастродуоденоскопии;
• колоноскопии;
• брнхоскопии.

Если же проблемной зоной оказалась полость, то тогда не обойтись без отсасывания со шприцом образовавшейся в полой части жидкости или вырабатываемого железой секрета.

Заключительной вариацией называют кюретаж. К нему прибегают, если приходится выскабливать потенциальный очаг поражения из органов с полостями, либо прямиком из полостей, которые образовались вследствие злокачественного процесса.

То, каким образом будет собираться биоптат, доктор решает еще на стадии предварительного обсуждения со своим подопечным. Для принятия окончательного решения в расчет берутся индивидуальные особенности организма испытуемого и предполагаемое место локализации воспаления.

Проводить контрольный срез должен только опытный врач, так как при несоблюдении правил забора материала в будущем велика вероятность получить итог с большими погрешностями. В лучшем случае сбор придется повторить, а при самом плохом раскладе онколог может вообще не заметить проблемы.

Не стоит опасаться ситуаций, когда лечащий специалист настаивает на том, что гистологию должен проводить патологоанатом. Именно он специализируется по заданному направлению исследований. Его иногда даже приглашают на саму операцию, а не только на стадию консультирования. Квалифицированный патологоанатом укажет на точное место для сбора тканевых образцов, а также заодно порекомендуют наиболее безопасный способ фиксации, подсказав точный объем клеток для замеров.

Если у потерпевшего обнаружили небольшой очаг, то тогда его отрезают целиком, а также дополнительно охватывают здоровую окружающую ткань в размере около одного сантиметра. Когда операция предусматривает удаление доброкачественного новообразования, то тогда хирургическое вмешательство подразумевает радикальную меру. Медики при подобном сценарии обязаны учитывать возможный эстетический эффект.

Иногда убрать все образование целиком не предоставляется возможным. Тогда объем нейтрализованного образца должен оказаться максимально большим, причем срезать ткани нужно там, где патология просматривается отчетливее всего. Также врач должен все время держать в голове риски травматизации желудка или любой другой изучаемой зоны. Настоящий профи постарается сделать так, что площадь здоровой части органа осталась максимально нетронутой, а произведенные действия не изменили структуру самого образца.

Если к работе привлекается электронож, то тогда линия отсечения должна находиться на расстоянии хотя бы за 2 миллиметра до главной точки поражения. К собранному материалу нужно относиться осторожно, избегая касания пальцами или смятия сопутствующими медицинскими инструментами. Держать образец разрешается только за тканевую полоску ткани.

Еще одной важной стадией забора клеток становится корректное оформление документации. Клиницист обязан не только правильно промаркировать биоптат, но и заодно внести все необходимые в протокол сведения о типе проведенной операции, а также заполнить описание удаленной части органа.

Лаборант должен проследить за тем, чтобы инициалы пациента прописывались аккуратно вместе с адресом. На том же документе делается пометка касательно локализации патологии, связь полученного материала с окружающими:

• органами;
• связками;
• мышцами.

Чтобы собранные ткани смогли успешно пережить транспортировку до исследовательского отдела, материал опускают в фиксирующий раствор. Также следует учитывать, что в первоначальном виде материал долго храниться не может из-за того, чтобы быстро подсыхает, искажая достоверность клинической картины. Первым в группу риска попали самые маленькие образцы, которые очень быстро теряют накопленную влагу.

Не все идеально, если оказывается, что образец слишком велик. Чтобы внутрь прошел формалин, медперсонал должен сделать небольшие надрезы. Вот здесь существует риск испортить заготовку из-за того, что неправильно сделанный надрез способен существенно нарушить первоначальную структуру волокон, что исказит результативность теста.

Из-за этого профи никогда не делают сквозных надрезов, а также всегда ограничиваются одним-двумя резами. По той же причине запрещено делить материал, чтобы отправить его в несколько лабораторий одновременно.

Объяснение тому – неоднородность опухолей, из-за чего срез с разных мест окажется неодинаковым по однородности. Это способно помешать корректному выбору тактики лечения.

Результаты, в зависимости от типа новообразования, обычно готовы в период от пяти дней до двух недель. Больше всего придется ждать при отправке теста на нормальность костной ткани.

Как проводят гистологические исследования?

Чтобы ткань можно было изучить под микроскопом, ее нужно особым образом подготовить. Начинают с того, что образец обрабатывают фиксирующим раствором, в противном случае клетки разрушатся собственными ферментами. Затем ткани придают плотность, заливая ее парафином — получается парафиновый блок.

В таком блоке находится множество слоев клеток, которые накладываются друг на друга, задерживают свет. Из-за этого под микроскопом не получится рассмотреть структуру ткани и отдельные клетки. Чтобы это стало возможно, блоки нарезают очень тонкие, от 1 до 8 мкм, слои с помощью специального инструмента — микротома. Затем проводят окраску — обработку особыми химическими веществами, которые вступают в реакцию с различными молекулами в клетках и окрашивают разные структуры.

После этого патоморфолог (также этого специалиста называют патологоанатомом, клиническим морфологом, гистопатологом) изучает образцы под микроскопом и составляет заключение. Весь процесс занимает около 7–10 дней.

Бывают случаи, когда результат гистологического исследования нужен срочно. Например, хирурги проводят операцию, и им прямо сейчас необходимо получить информацию, чтобы принять правильное решение. В таких ситуациях проводят ускоренную подготовку: образец ткани замораживают, нарезают микротомом и сразу изучают под микроскопом.

Закажите обратный звонок. Мы работаем круглосуточно

Общее описание

Гистологическое (патоморфологическое) исследование — это исследование образца тканей, взятого из организма человека. Материал для гистологического исследования чаще всего получают с помощью биопсии — методики взятия тканей от больного с диагностической целью. Гистологическое исследование является самым важным в диагностике злокачественных опухолей и одним из методов оценки эффективности лекарственной терапии.

Виды биопсии

Наружные биопсии — это биопсии, при которых забор материала производится непосредственно под «контролем глаза». Например, биопсии кожи, видимых слизистых, мышц. Внутренние биопсии — это биопсии, при которых кусочки ткани для исследования получают специальными методами. Так, кусочек ткани, взятый путем пункции с помощью специальной иглы называют пункционной биопсией, взятые путем аспирации кусочка ткани называют аспирационными биопсиями, путем трепанации костной ткани — трепанационными. Биопсии, полученные путем иссечения кусочка при рассечении поверхностно расположенных тканей, называют инцизионными, «открытыми» биопсиями. Для морфологической диагностики используются также прицельные биопсии, при которых забор ткани производится под визуальным контролем с помощью специальной оптики или под контролем УЗИ.

Взятие материала для биопсийного исследования должно производиться на границе с неизмененной тканью и, по возможности, с подлежащей тканью. Нельзя брать для биопсии кусочки из участков некроза или кровоизлияний.

После забора биопсийный и операционный материал должен быть сразу доставлен в лабораторию, при задержке доставки — сразу зафиксирован. Основным фиксатором является 10-12%-ный раствор формалина или 70%-ный этиловый спирт, при этом объем фиксирующей жидкости как минимум должен в 20-30 раз превышать объем фиксируемого объекта. При направлении для патоморфологического исследования материала, чаще всего, опухолевой ткани, лимфатических узлов до фиксации необходимо сделать мазок для цитологического исследования.

Виды гистологического исследования

Гистологическое исследование бывает срочным и плановым. При срочном исследовании полученные ткани замораживают, после чего выполняют срезы специальным ножом (микротом). Исследование занимает 30-40 минут. После окрашивания врач оценивает ткани с помощью микроскопа. Срочные исследования производятся во время хирургического вмешательства с целью решения вопроса о характере и объеме операции.

При плановом исследовании ткани помещают в специальный раствор, после чего заливают в парафин, выполняют срезы и прокрашивают. Длителность исследования в этом случае составляет порядка 5-10 дней.

Результаты биопсии

Врач-патоморфолог (патологоанатом, морфолог), проводя исследование, производит макроскопическое описание доставленного материала (размеры, цвет, консистенция, характерные изменения и др.), вырезает кусочки для гистологического исследования, указывая какие необходимо использовать гистологические методики. Исследуя изготовленные гистологические препараты, врач описывает микроскопические изменения и проводит клинико-анатомический анализ обнаруженных изменений, в результате которого делает заключение.

В заключении может быть ориентировочный или заключительный диагноз, в ряде случаев — только «описательный» ответ. Ориентировочный ответ позволяет определить круг заболеваний для проведения дифференциального диагноза. Заключительный диагноз патоморфолога является основой для формулировки клинического диагноза. «Описательный» ответ, который может быть при недостаточности материала, клинических сведений, позволяет иногда высказать предположение о характере патологического процесса. В некоторых случаях, когда присланный материал оказывается скудным, недостаточным для заключения, при этом патологический процесс мог не попасть в исследуемый кусочек, заключение патоморфолога может быть «ложноотрицательным». В случаях же отсутствия необходимых клинико-лабораторных сведений о больном или их игнорировании ответ патоморфолога может быть «ложноположительным». Во избежание «ложноотрицательных» и «ложноположительных» заключений необходимо совместно с врачом-клиницистом проводить тщательный клинико-анатомический анализ обнаруженных изменений с обсуждением результатов клинического и морфологического обследования больного.

При диагностических биопсиях дается микроскопическое описание и нозологическое заключение. В ясных и банальных случаях микроскопическое описание не дается или ограничивается минимально, заключение ограничивается гистологическим диагнозом.

Гистологический диагноз может быть описательным в тех случаях, когда морфологические изменения не специфичны и не свидетельствуют в пользу какого-либо заболевания или когда недостаточно представляется клиницистами клиническая картина конкретного пациента. Гистологическое заключение дается в соответствии с последними гистологическими классификациями ВОЗ и медицинской номенклатурой принятой в России.

Край резекции

После радикальной операции при онкологических заболеваниях зачастую требуется оценить край резекции, и это тоже можно сделать во время гистологического исследования:

• Негативный край резекции означает, что вблизи линии разреза нет опухолевых клеток. Значит, опухоль была удалена полностью, и риск рецидива минимален.
• Позитивный край резекции говорит о том, что возле линии разреза обнаружены опухолевые клетки. Часть опухолевой ткани могла остаться в организме, и заболевание может рецидивировать. В таких случаях назначают повторное хирургическое вмешательство или лучевую терапию, противоопухолевые препараты.

Степень дифференцировки/степень злокачественности

Степень дифференцировки и степень злокачественности характеризуют агрессивность опухоли, влияют на выбор тактики лечения и прогноз.

Степень дифференцировки обозначается буквой G:

• Высокая степень дифференцировки (G1): опухолевая ткань сильно напоминает нормальную.
• Средняя степень дифференцировки (G2): опухолевая ткань сильнее отличается от нормальной, но все еще на нее похожа.
• Низкая степень дифференцировки (G3): опухолевая ткань сильно отличается от нормальной.
• Недифференцированные опухоли (G4): раковые клетки совсем теряют черты нормальных, все становятся одинаковыми, расположены хаотично.

Чем ниже степень дифференцировки, тем выше степень злокачественности. Опухоли G3 и G4 наиболее агрессивны, быстрее вторгаются в окружающие ткани, метастазируют.

Патоморфологическое стадирование

В онкологии существуют такие понятия, как клиническая и патоморфологическая стадии рака. Эти термины часто применяются при злокачественных опухолях молочной железы. Клиническую стадию устанавливают, опираясь на данные клинического обследования, а патоморфологическую — по результатам гистологического исследования удаленных тканей. Патоморфологическая стадия более точна, после ее установления может существенно измениться программа лечения.

Что влияет на точность гистологического исследования?

Гистологическое исследование — очень точный метод диагностики. Но все же в редких случаях встречаются ошибки. Они бывают связаны с разными факторами:

• Недостаток опыта у врача, который осуществляет забор образца ткани.
• Во время биопсии не удалось получить нужное количество ткани, или она была получена не из того места.
• Нарушение условий транспортировки биоматериала, технологий приготовления гистопрепаратов.
• Недостаточный уровень квалификации патоморфолога, который изучает ткань под микроскопом.

Чтобы получить максимально точный, достоверный результат, нужно уделить внимание выбору клиники, в которой будет проводиться биопсия. Важно, чтобы в ней работали опытные врачи, применялось современное оборудование. Нужно поинтересоваться, с какими патоморфологическими лабораториями сотрудничает клиника. Если закрались сомнения в точности диагноза, можно заказать пересмотр гистопрепаратов в другой лаборатории. Чаще всего для этого не нужно проводить повторную биопсию: материал хранится в лаборатории, где проводилось исследование, и его можно получить, оформив заявку. Если же ошибка произошла во время забора материала, то процедуру придется повторить.

Мы вам перезвоним

Оставьте свой номер телефона

Что представляет собой гистологическое исследование

Гистологическая диагностика обязательно входит в программу обследования пациентов с подозрением на онкологию перед операцией, химиотерапией, лучевой терапией. Данный вид исследования предполагает непосредственное изучение тканей новообразования для подтверждения или опровержения онкологического диагноза. Забор тканей осуществляют из внутренних органов и тканей пациента в очаге поражения. Затем биообразцы обрабатывают и изучают в лаборатории под микроскопом.
Метод дает возможность:

• выявить рак на ранней стадии, а также метастазы;
• определить нарушение функций, структуры исследуемых тканей;
• правильно выбрать комбинацию методов лечения, технику операции.

Его применяют при онкозаболеваниях органов ЖКТ, кожи и мягких тканей, молочной и щитовидной желез, органов грудной клетки, а также при онкоурологических, онкогинекологических болезнях.

Зачастую гистологические исследования тканей дополняют цитологической диагностикой, в ходе которой врачи изучают отклонения в структуре и функциях клеток. В ряде случаев для проведения цитологии достаточно взять мазок (например, с тканей матки), смыв или образец жидкости. Гистологический же метод связан с необходимостью забора биоматериала из внутренних органов.

Какие еще анализы проводят в патоморфологической лаборатории?

Помимо гистологического исследования, можно провести дополнительные анализы, которые помогут уточнить тип заболевания, оценить прогноз, подобрать правильное лечение:

• Иммуногистохимический анализ (иммуногистохимия) помогает обнаруживать определенные белки с помощью меченых антител.
• Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) — метод выявления дефектных генов с помощью ДНК-зондов.
• Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — исследование, во время которого нужный фрагмент ДНК многократно копируют с помощью ферментов, после чего он становится доступен для изучения.
• Секвенирование нового поколения (NGS) — методика, позволяющая полностью «прочитать» генетический код и обнаружить различные мутации.

Эти исследования играют особенно значимую роль в онкологии: они помогают правильно подобрать комбинации противоопухолевых препаратов, назначить эффективную таргетную терапию, иммунотерапию. В клинике Медицина 24/7 доступны все виды молекулярно-генетической диагностики.

Материал подготовлен врачом-онкологом, хирургом клиники «Медицина 24/7» Семушиным Валентином Валентиновичем.